Περίληψη
Προηγουμένως έχει αποδειχθεί ότι ο αυτοαδρανοποιούμενος λεντιβιακός φορέας γ-σφαιρίνης GGHI μπορεί να αυξήσει σημαντικά την εμβρυϊκή αιμοσφαιρίνη (HbF) σε ερυθροειδή κύτταρα από ασθενείς με μεσογειακή αναιμία και, συνεπώς, να βελτιώσει τον φαινότυπο της νόσου Στην παρούσα μελέτη, ο φορέας GGHI βελτιώθηκε περαιτέρω με την ενσωμάτωση νέων ενισχυτικών στοιχείων και επίσης με ψευδοτυποποίηση με τη γλυκοπρωτεΐνη του φακέλου του ενδογενούς ιού των μπαμπουίνων BaEVRless, η οποία στοχεύει αποτελεσματικά και ειδικά τα ανθρώπινα κύτταρα CD34. Αξιολογήσαμε την υπόθεση ότι ο πρόσφατα κατασκευασμένος φορέας που ονομάστηκε GGHI-mB-3D θα αύξανε τον τροπισμό των κυττάρων hCD34 και, συνεπώς, την αποτελεσματικότητα της μεταγωγής σε χαμηλή πολλαπλότητα μόλυνσης, οδηγώντας σε αυξημένη έκφραση του διαγονιδίου. Καταδείχθηκε υψηλή και σταθερή έκφραση HbF σε θαλασσαιμικά κύτταρα για τον προκύπτοντα φορέα GGHI-mB-3D/BaEVRless, ο οποίος παρουσίασε αυξημένη αποτελεσματικότητα μεταγωγής σε σύγκριση με τον αρχικό φορέα GGHI-mB-3D/VSVG, με ταυτόχρονη μέση αύξηση του HbF κατά 91% σε μέσο αριθμό αντιγράφων φορέα ανά κύτταρο 0,86 και μέση αποτελεσματικότητα μεταγωγής 56,4%. Οι μεταλλαγμένοι πληθυσμοί παρουσίασαν επίσης μια τάση προς όψιμη ερυθροειδή, ορθοχρωματική διαφοροποίηση και μειωμένη απόπτωση, μια περαιτέρω ένδειξη επιτυχούς θεραπείας γονιδιακής θεραπείας. Παρακολουθώντας την έκφραση της , ενός βασικού συνδέσμου μεταξύ αυτοφαγίας και απόπτωσης, διαπιστώθηκε ότι η διόρθωση αυτή συσχετίζεται με τη μείωση της ενισχυμένης ενεργοποίησης της αυτοφαγίας, χαρακτηριστικό γνώρισμα των θαλασσαιμικών πολυχρωματοφιλικών νορμοβλαστών. Αυτή η εργασία παρέχει νέες μηχανιστικές γνώσεις για τη μεσολαβούμενη από τη γονιδιακή θεραπεία διόρθωση της ερυθροποίησης και καταδεικνύει τον ευεργετικό ρόλο της γλυκοπρωτεΐνης του φακέλου BaEVRless σε σύγκριση με την ψευδοτυπία VSVG και του νέου λεντιϊικού φορέα GGHI-mB-3D/BaEVRless για την ενισχυμένη γονιδιακή θεραπεία της μεσογειακής αναιμίας.
Προηγουμένως έχει αποδειχθεί ότι ο αυτοαδρανοποιούμενος λεντιβιακός φορέας γ-σφαιρίνης GGHI μπορεί να αυξήσει σημαντικά την εμβρυϊκή αιμοσφαιρίνη (HbF) σε ερυθροειδή κύτταρα από ασθενείς με μεσογειακή αναιμία και, συνεπώς, να βελτιώσει τον φαινότυπο της νόσου Στην παρούσα μελέτη, ο φορέας GGHI βελτιώθηκε περαιτέρω με την ενσωμάτωση νέων ενισχυτικών στοιχείων και επίσης με ψευδοτυποποίηση με τη γλυκοπρωτεΐνη του φακέλου του ενδογενούς ιού των μπαμπουίνων BaEVRless, η οποία στοχεύει αποτελεσματικά και ειδικά τα ανθρώπινα κύτταρα CD34. Αξιολογήσαμε την υπόθεση ότι ο πρόσφατα κατασκευασμένος φορέας που ονομάστηκε GGHI-mB-3D θα αύξανε τον τροπισμό των κυττάρων hCD34 και, συνεπώς, την αποτελεσματικότητα της μεταγωγής σε χαμηλή πολλαπλότητα μόλυνσης, οδηγώντας σε αυξημένη έκφραση του διαγονιδίου. Καταδείχθηκε υψηλή και σταθερή έκφραση HbF σε θαλασσαιμικά κύτταρα για τον προκύπτοντα φορέα GGHI-mB-3D/BaEVRless, ο οποίος παρουσίασε αυξημένη αποτελεσματικότητα μεταγωγής σε σύγκριση με τον αρχικό φορέα GGHI-mB-3D/VSVG, με ταυτόχρονη μέση αύξηση του HbF κατά 91% σε μέσο αριθμό αντιγράφων φορέα ανά κύτταρο 0,86 και μέση αποτελεσματικότητα μεταγωγής 56,4%. Οι μεταλλαγμένοι πληθυσμοί παρουσίασαν επίσης μια τάση προς όψιμη ερυθροειδή, ορθοχρωματική διαφοροποίηση και μειωμένη απόπτωση, μια περαιτέρω ένδειξη επιτυχούς θεραπείας γονιδιακής θεραπείας. Παρακολουθώντας την έκφραση της , ενός βασικού συνδέσμου μεταξύ αυτοφαγίας και απόπτωσης, διαπιστώθηκε ότι η διόρθωση αυτή συσχετίζεται με τη μείωση της ενισχυμένης ενεργοποίησης της αυτοφαγίας, χαρακτηριστικό γνώρισμα των θαλασσαιμικών πολυχρωματοφιλικών νορμοβλαστών. Αυτή η εργασία παρέχει νέες μηχανιστικές γνώσεις για τη μεσολαβούμενη από τη γονιδιακή θεραπεία διόρθωση της ερυθροποίησης και καταδεικνύει τον ευεργετικό ρόλο της γλυκοπρωτεΐνης του φακέλου BaEVRless σε σύγκριση με την ψευδοτυπία VSVG και του νέου λεντιϊικού φορέα GGHI-mB-3D/BaEVRless για την ενισχυμένη γονιδιακή θεραπεία της μεσογειακής αναιμίας.